SYBR绿色化学结构

荧光增强可以通过核酸的存在来测量,核酸与寄生虫血症水平呈线性相关。

必须建立一个体外模型系统来评估潜在药物的效力。疟疾寄生虫会感染红细胞,红细胞不含细胞核,因此没有自身的DNA;可以通过测定DNA浓度来推断寄生虫的浓度。这通常是通过使用一种名为SYBR Green的分子来实现的,这种分子与双链DNA的小凹槽结合。与DNA分子的接触使SYBR的荧光增强100倍以上。将感染的红细胞与潜在的药物孵育,用荧光光谱法对每个样本的DNA含量进行定性测量。为了评价结果,必须对样品进行阳性和阴性对照。

板设置

  • 感染细胞+ SYBR绿色=阳性对照
  • 未感染细胞+ SYBR绿色=阴性对照
  • 感染细胞+ SYBR绿色+抗疟药=样本

受感染的细胞含有恶性疟原虫和人红细胞,它们处于含有人血清、葡萄糖、次黄嘌呤和庆大霉素的RPMI培养基中。未被感染的细胞和被感染的细胞有相似的组成,但是被感染的细胞不含有P.falciparum。为了确保均匀的孵育条件,将样品装入96孔微孔板并孵育48小时。每个样品应获得多个副本,以确保一致的结果。然后,通过比较样品与两个对照的平均荧光,可以评估药物的效力。

疟疾基因的发现

理论概述

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