La relazione tra assorbanza e concentrazione è lineare ed è descritta dalla legge di Beer-Lambert come segue:

c :concentrazione molare della sostanza rilevata.

A :valore di assorbanza restituito dallo spettrofotometro. Si noti che l'assorbanza non ha unità ma è tipicamente descritta in "unità arbitrarie" (UA).

ε:coefficiente di estinzione molare格瓦拉dipendedalla lunghezza d'onda (chiamato anche assorbimento molare) in mol/cm.

L :lunghezza del percorso in cm (per la maggior parte degli spettrofotometri che utilizzano cuvette standard è di 1 cm).

La presente equazione può essere facilmente riorganizzata per soddisfare le esigenze della sperimentazione. Ad esempio, A = ecl può essere trasformato in c=A/el per convertire i valori di assorbanza in concentrazione.