Dopo la熔丝di rivestimento viene utilizzato联合国gente bloccante. Si tratta di una proteina irrilevante che non interferisce con l'esperimento stesso. Copre tutti i siti di legame sulla superficie insaturi nei pozzetti della micropiastra, prevenendo così il legame non specifico delle proteine alla micropiastra durante le fasi successive del dosaggio. Il legame non specifico può risultare infalsi positivi. Un tampone bloccante ottimale massimizza il rapporto segnale-rumore ed è importante che non interagisca con gli anticorpi o la molecola bersaglio.

L'agente bloccante può essere una proteina o un detergente (o un brodo). Agenti bloccanti comuni sono Tween 20 (un detergente non ionico), latte in polvere scremato, gelatina e albumina di siero bovino (BSA).