Le colture aderenti devono essere subcoltivate quando si trovano nella熔丝迪crescita esponenzialee prima che raggiungano la confluenza; in caso contrario, impiegheranno più tempo a riprendersi dopo la nuova semina. Di solito è possibile individuare a livello visivo il momento giusto, stimando la percentuale di confluenza come la quantità di spazio libero tra le cellule. L'intervallo di valori consueto per eseguire il passaggio cellulare è del 70-90%. È inoltre importante eseguire la subcoltura delle cellule attenendosi a un programma prestabilito, per garantire un comportamento riproducibile che permetta di monitorarne lo stato di salute. Le deviazioni dai modelli di crescita di solito indicano che la coltura non è sana o che un componente del sistema di coltura non sta funzionando correttamente. Pertanto è altamente consigliabile tenere un registro dettagliato della crescita della coltura cellulare.
Il primo passaggio per subcoltivare delle cellule aderenti consiste nel distaccarle dalla superficie del recipiente di coltura. È possibile farlo attraverso procedure enzimatiche o meccaniche, come mostrato nella tabella sottostante.
| Procedura | Agente di dissociazione |
|---|---|
| Scuotimento | Agitazione od oscillazione del recipiente di coltura, oppure pipettaggio vigoroso |
| Raschiatura | Raschietto per cellule |
| Dissociazione enzimatica | Tripsina; tripsina + collagenasi; dispasi |