两相分析物之间存在平衡。分析物与固定相相互作用的次数越多，它停留在色谱柱中的次数就越多。如果它与移动阶段的交互更多，它在列中的停留时间就会更少。分配系数(K)，用以联系分析物在两相中的浓度，如下图所示:

在哪里K为分配系数，C_一个^{固定\阶段}分析物在固定相中的摩尔浓度是C_一个^{移动\阶段}是分析物在流动相中的摩尔浓度。分析物在固定相中停留的时间越长，在固定相中停留的时间越长K价值是多少。