连续培养的细胞株容易发生遗传漂变,有限的细胞株注定会衰老,所有的细胞培养都容易受到微生物污染,甚至是运行最好的实验室也可能出现设备故障。由于已建立的细胞株是一种有价值的资源,而它的替换又昂贵又耗时,因此将它们冷冻并长期保存是至关重要的。

超低温保存培养细胞的最佳方法是将细胞保存在完全培养基中的液氮中,并加入二甲亚砜(DMSO)等低温保护剂。低温保护剂可以降低介质的冰点,并允许较慢的冷却速度(每分钟1°C),从而大大降低冰晶形成的风险,冰晶形成会损害细胞并导致细胞死亡。

记住要将培养的细胞以高浓度和尽可能低的传代次数冷冻,在冷冻前确保细胞至少有90%的存活率,并始终穿戴个人防护装备。

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