在细胞中可能存在分离和分离grâce à和méthode提取phénol-chloroforme。在méthode允许获得一个génomique的一个大陆数以百万计的gènes。把它孤立起来gène spécifique à从l'ADN génomique,在可以贴花的地方聚合酶链反应可以使用spécifiques。Si le gène d'intérêt a été四在一个向量,一个酶de限制Spécifique peut être utilisée pour l' isolation。

Les aciides nucléiques des cellules peuvent être isolés grâce à la méthode d'extraction au phénol-chloroforme。卫生棉条和氯仿的phénol-chloroforme是mélange和phénol saturé,两者的关系是1:1。première étape提取液用于细胞裂解,homogénéisation用于水溶液。套间,phénol-chloroforme是ajouté还是mélange,这可以允许créer两个阶段用于séparées离心分离法。Le phénol purifié一densité de 1,07 g/cm3.那么氯仿一个densité加上élevée(1,47克/厘米3.).Par conséquent, la离心产物两相:la相组织inférieure和la相渡槽supérieure。
leacides nucléiques acquièrent leur polarité grâce à leur squelette phosphate de charge négative;它在水相中溶解supérieure。protéines大陆上的régions憎水剂与phénol和précipitation在两个阶段之间的界面(为了形成絮凝剂)。脂质également和région疏水和相组织的溶剂inférieure。Le pH du mélange détermine la séparation des酸nucléiques。水相结构中pH值为中性,水相结构中pH值为中性,水相结构中pH值为déplace水相结构中pH值为inférieure水相结构中pH值为déplace水相结构中supérieure。在dernière étape中,酸液nucléiques在récupérés中在相aquuse中précipitation à在异丙醇中。
结果(或浓度)等pureté l'ADN peuvent être déterminés n meurant l'absorbance à l' d'un spectrophotomètre。纳米滴spectrophotomètre可测量0,5 à 2 μl,可用于rétention d'échantillon。système de rétention d'échantillon允许测量échantillons à不稀释的浓度。L 'ADN吸光度为mesurée à 260 nm (A260), où L 'ADN吸光度为lumière。La quantité de lumière absorbée是相称的à La quantité d' adn在l'échantillon。
关系为décrite比尔-朗伯方程:c = (A * ε)/b
c: la浓度d'acide nucléique en ng/μL
A: l' UA吸光度
ε:消光系数lié à衰减系数ng-cm/μL
B:口径为厘米的弹道光学镜片
双布林消光系数为50 ng-cm/μL
在这张图上,纳米雨滴的弹道光学镜片直径为10毫米
La pureté的l'ADN可以être évaluée在测量值上à λ = 280 nm, λ = 230 nm λ = 320 nm计算260/280 nm, 260/230 nm和260/320 nm。酸类nucléiques吸收剂la lumière à 260nm污染物组织为phénol和Trizol吸收剂la lumière à 230nm和protéines à 280 nm。Ni les酸nucléiques Ni les protéines n’吸收剂la lumière à 320 nm。
260/280,环境融洽度1,8是généralement accepté comme étant在这里,当我们在这里,环境融洽度2。依次为:260/320,1,8 à 2,2表示généralement,而échantillon d' s nucléique表示accepté。Pour 260/230, un rapport < 1,8 représente une présence有效的污染物组织。