LaTecnología网关ProporcionaUnaVíaDeclonación.rápiday efitiede。estatecnologíase basa enlaultizacióndeversionesmodificadas de las Recombinasasasasasasasasasasasasasasasasasasasasasasassassasasasasasassassassassassassassassassassassassassasassassassassassassassassassassassassassassassassasselbacteriófagolambda。EL病毒INSERTA SU Genoma en El Adn delHuéspedusando estas elasimas。El Sistema deClonaciónGatewayLas USA Para Lograr UnaRecombinaciónAtlamenteEfitiedede Sitios Espectsyficos。La Segundacaracterísticaútteteeste sistema son sus sitios de Reconcimiento para las enzimas克隆酶,denominadosSITIO ATT.,y el uso deferentes tipos de矢量图

Healtga La SiguienteAnimaciónAbenerUNAVisiónVELAGEACCIONEN DE GATEWAY。

Reacciones bp y lr

Las Recciones BP Y LR Son Las Maneras Que Tienen Los Diferentes Segsos de Adn de Cambiar de Sitio Dentro de Las Construciones。Durante LaReaciónBP,SE Recombinan Los Sitios Attb Y Attp。EstaReaciónintercambia el Adn de las Cadenas,Lo Cual da Lugar A Un Sitio Attl Y Un Sitio Attr。Durante LaReaciónLR,Los Sitios Attl Y Attr Se Recombinan de Forma类似Y Crean Sitios Attb Y Attp。Hay UnNúmeroPixadode Sitios Att,Que Se Identifican Conneros。Esto意义Que Hay UnNúmeroInctadode Combinaciones。Cada Sitio Se RecombinaúnicamenteDentrode Su Grupo。Por Ejeallo,Los Sitios Attl1 Solo Se Recombinan Con Los Sitios Attrio Att1 Y Dan Lugar A Sitios Attb1 Y Attp1。LaOrientacióndeestosItiostambiénespeedífica,y laconstuccióngénicaesallamente。laconstruccióndeseada puede obeneroders seleccionando los extremosat,las reacciones y los矢量adecuados。

Tipos de Vectores.

Los Sitios Att Royiclables儿子理想Para LaCraecióndeBibliotecasde Vectorys Que Pueden利用Quidarse Para Combinar DistintosComponentes de Circuito.De Manera效力。

矢量deExpresión.amp.r):El Clon deExpresiónESELProductoFinal De UnaReaciónGation。Es ElPlásmidoFiredo,Listo Para LaTransformación。

矢量onante.CCD.B,r):el矢量donante proporciona la cadena a partir de la que se crean los clones de intrada。Los Vectorys Donantes Suelen Llevar Nombres Que Empiezan Por«PDONR»。estosplásmidostienen sitios attb o attp flanqueando el Gen Ccdb,AdemásdelGedeLeterenciaA La Kanamicina。

矢量de entinadar):Los Vectores de entrada se crean a partil del矢量donante y de Una secuencia de Adn Flanqueada Por Lositios Att Complementarios。Estas Secuencias deInteréssuelen Producirse MediantePCR.,Con Cebadores Que Contienen Los Sitios Att。Los Vectorys de intenadentinen sitios attl o attr que flanquean la secuencia deInterés,AdemásdelGedestenciaA La Kanamicina。Los Vectores de entinadada son理想Para Las Bibliotecas de Companctiones de Circuito。

矢量de destinoCCD.B,amp.r):El Vector de destino proporciona la Cadena para crear los克隆deExpresión。Los Vectores de destino suelen llevar nombres que empiezan por por por por。estosplásmidoscontienen el Gen Ccdb Flanqueado Poritios Attl O Att,AdemásdeNeGeTistenciaA La Ampicilina。Los Vectorys de destinotambiéncontienen losOrígenesdereplicacióndhehéspeessectemíficosy addadndandandionales。

Selección.

LaSeleccióndeLosVectorys deInterésnenlosdiferentes pasos del proceso deClonaciónGatewayEs Muy Expresse。Para LaSelección,El Sistema Gateway SE Basa en DosLos antiziSticosY en El Gen CCDB Para Realizar UnaSelecciónPositiva。La Trainencia A Los Altizeticos Permite A LasCélulasydroadadasCrecer en U联合Medio Con AltiCos Que Matan A LasCélulas没有变形领域。

Haz ClicAquísiquieressabermássobrela替补群岛A La Ampicilina

elCCD.B编码杆UNA Bacteriotoxina Que意识到LaReplicacióndeAdn。Todas Las Cadenas Para Los Clones Gateway(Pdest Y Pdonr)Llevan Este Gen,Y Solo Las Bacterias Con Un GenCCD.A AdicionalCreceránCuandoLas TransformenedestosPlásmidos。

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