Das Gibson-Assembly IST Eine Klonierungstechnik,Die NichtWieHerkömmlicheklonierungsverfahren aufDrestiktionsStellenAngewiesen ist。Das Gibson-Assembly beruht auf dem vorhandensein syologer regionen an den enden der dna-stücke。
Die DREI酶T5- exonuklease,phusion-DNA-聚合酶und Taq-dna-ligase bearbeiten aleter noterschiedliche teile der dna-enden。zunächstschneidet die t5-exonuklease die 5er-enden ab und erzeugt soeinzelsträngigeKoundlementäreüberhängeZwischen den den den beideneinschüben。dieseüberhängeverbinden sich,und die phusion-polymerasefügtdie die fehlenden nukleotide zwischen die sequenz derdoppelträngigendna ein ein,wobei der homologe der gobei der homologeüberhang阿尔斯·阿尔斯·阿尔斯·阿尔斯·阿尔斯priming-sequenz verwendet wird。Gang Gesetzt中的Einmal,IST DIE PHUSIONREAKTION VIEL SCHNELLER ALS DIE LANGSAME NUKLEASE和DIELückenWerden Raschgefüllt。Im Letzten SchrittSchließt模具连接酶Den Strangbruch和Verschmilzt Die Beiden dna-Fna-Fna-fragmente Miteinander。Alle Diese酶Sind Bei50ºCAktiv。DaherKönnenMehrere dna-Stücke在EinemEinzigenRöhrchenZusammengefügtWerden中。
Das Gibson-Asembly Wird Verwendet,UmGroßeSchaltkreiseaus aus位置-DektorenZu Konstruieren。
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