HPLC仪器中的泵会产生驱动力移动阶段和通过柱子的分析物。泵也负责产生高压和系统中的恒定流动。HPLC仪器适于能够处理高压，但是系统中的压力是重要的，因为它可能会损坏列。通常，柱内的压力（也称为Backruture）在2,000至5,000 psi之间。有几个泵的类型可用于HPLC系统。