iPSC クローンの品質の信頼性を高めるため、1つまたは 2つだけではなく、いくつかの PSC マーカーの発現を確認することをお勧めします。定評のあるマーカーには、 転写因子 OCT4 および SOX2 があります。これらは多能性の維持において重要な役割を果たすことが知られています。

OCT4およびSOX2は細胞内タンパク質であるため,これらのマーカーを染色するには細胞の固定と透過化が必要です。つまり、クローンの複製培養物を保持しつつ、培養を終了する必要があります。このキットでは、SSEA4 および TRA-1-60 というヒト PSC の 2 つの主要表面マーカーも分析できます。したがって、最大 4 つのマーカーを分析できます。

このキットには、一次抗体と二次抗体の完全なセット、核 DNA 染色試薬 (DAPI)、固定した PSC の染色を最適化するための作製済みバッファが含まれます。キットに含まれる抗体は高い性能と多重化能力が検証されているため、一度の 2つのマーカーを詳細に評価できます。

図 1:SSEA4 (緑) および OCT4 (赤) と、核対比染色として DAPI (青) を使用する、フィーダーフリー iPSC 培養の免疫細胞化学分析。