lasecuenciacióndel del ad andmétodopara识别式cada una de las bas que conforman la cadena de adn。

SecuenciacióndePrimeraGeneración

figura 1：Métododeterminacióndela Cadena。LasMoléculasde adn marcadas son siparadas enfuncióndesutamaño。CadaMoléculaTieneUnnucleótidoodificado（DDNTP），Marcado con un tinte de fluorescencia。El Color Diferente de fluorescencia indica una una baseespecífica。

lasecuenciacióndeprimerageneraciónhacereferenciaalmétododeterminacióndela cadena，desarrollado por fredrick sanger ycompañerosycompañerosen 1977（figura 1）。LaMoréculade adn se amplifica con unnucleótidoodificado，允许solo solo unaadiciónde base por ciclo。后端，Se Amplifica con una longitud变量：Cada par de la Cadena esMásLargoquelaMoléculaterterior。EstasMoléculas，连续的，儿子Syparadas en un Capilar。CADA BASE ES MARCADA CON UN TINTE DE FLUORERORESCIA。中间La lectura de lasseñalesdiferentes彩色，Somos Capaces de Identifar la Base（A，G，T O C）。

secuenciacióndenuevageneración

lasecuenciacióndenuevageneraciónes unatecnologíadesecuenciaciónavanzada，en donde muchas mochasmoléculascortas cortas de adn son son secuenciadas a la vez a la vez。latecnologíaTambiénse denominasecuenciaciónMasivaen paralelo。Estasmoléculascortas de adn，Continuación，Se Ensamblan，Comparando su secuencia con una con una secuencia de corefencia，de este modo，de este modo，revelando la secuencia posterma de adn，que puede puede ser muy larga（tan larga como nuestro nuestro基因！

Hay Muchas plataformas diferentes desecuenciacióndenuevageneracióny cada una una de ellas utiliza unatécnicadesecuenciacionde diferente。En Este Caso，Nos Centraremos en latecnologíadeterminacióndetinte可逆的de iLlumina。EnesteMétodo，Primero se fragmenta el adn en cadenasmáscortas，y dosmoléculascortas de adn，llamadas«adaptadores»，儿子Ligadas A Cada oxtremo de la Muestra（Figura 2）。Estos Adaptadoresfuncionaráncomolugar de acoplamiento de Cebadores，Para放大器El Adn Durante la Pcr y para para unirse a la celda de flujo。Antes de Analizar los Datos，retirareMos estos adaptadores porque no son una secuenciabiológica。

lasmoléculasde adn limitadas con adaptadores y cebadores，son puestas primero en un portaobjetos（denominado celda de flujo）y amplificadas con una enzima polimerasa，dando lugar a colonias colonias colonias colonias locales de adn clonal de adn clonal。Estas Colonias de adn儿子TambiénConocidascomoclústersde Genes。CadaclústercontieneCenteramentela Misma secuencia de adn;deahíElTérminode colonias de adn clonal。类似的是secuenciacióndeprimeragentación，洛斯核tidos son marcados con con in tinte de fluorescencia。DespuésDelaadicióndeunnucleótido，laelongaciónse detiene y se toma una Imagen。Seguido A ESTO，El Bloqueador，Ubicado en el oprarto 3，Es leminadoquímicamentedel adn，plaseiendo seguir con el Siguiente cicloiente ciclo deadicióndenucleótidos。

lasecuenciaciónen paralelo生产millones y Miles de Millones de lecturas porejecución。ES指数市长las lecturas produciDas MediantesecuenciacióndePrimera Genereragentración。La secuenciación de nueva generación es una potente técnica que puede ser empleada para muchas aplicaciones diferentes, como el perfil SNP, el análisis de la expresión génica y la detección de aberraciones genéticas, como mutaciones o reordenamientos cromosómicos.una vez que el adn se Extrale，tiene que ser para paraasíSerpara para lasecuenciación。

los diferentes pasos en lapreparacióndela muestra esumidos aContinuación：

• Fragmentación
• ReparaciónDeExtremo
• 可乐a
• LigaciónDelAdaptador
• Amplificacióndepcr

实际上，实际上是siguen lageneracióndelclústery el proceso desecuenciación。

mutacióndel adn

Hay Muchas clasificaciones para las utaciones del adn;PUEDES OBTENERMásInformaciónSobrela insella de lamutaciónsegúnsegúnla forma en ema en que escrita escrita。Por Ejemplo：

• 345G> t显着性Hay una unasupstitucióndelnucleótido，de guanina a timina，en laposición345。
• 345delgt显着性Hay una unaemiminacióndedosnucleótidos（Guanina y timina）Empezando en laposición345。
• 345DUPA显着性Hay unadeplicaciónenlaposición345，dando lugar a dos n dos norsuos de adenina。
• 345Insta显着Hay Dosnucleótidosinsertados（Timina y Adenina）Empezando en laposición345。