核酸杂交是一种分析生物样品的DNA或RNA的技术。它可用于测量表达水平或基因分型。核酸杂交基于两个的特异性结合(退火)补充单链核酸(DNA或RNA)分子。在DNA中,碱腺嘌呤始终形成与胸腺嘧啶的键,而鸟嘌呤始终形成与胞嘧啶的键。在RNA中,胸腺氨酸取代,与腺嘌呤形成碱基对。

为了进行核酸杂交分析,首先从样品中纯化DNA或RNA。稳定的双链核酸序列是变性的,并碎片形成短单链,可以用已知的序列与单链寡核苷酸结合,称为探针。通过荧光,放射性或化学发光报告基标签检测到未结合的DNA或RNA,并将靶DNA或RNA与探针的结合与探针结合。如有必要,可以在分析之前通过PCR扩增样品DNA(扩增的DNA杂交测定法)。

图1:核酸杂交:将单链靶DNA或RNA添加到寡核苷酸探针中(步骤1)。靶DNA或RNA与互补探针结合(步骤2)。洗净未结合的靶DNA或RNA并检测到互补结合(步骤3)。

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