PCR (Réaction en chaîne par polymérase)

PCR是一个méthode utilisée pour préparer des milliards de copies de séquences d'ADN spécifiques。这是nécessaire有大量的séquence和spécifique的副本在échantillon型的分析者中有大量的副本在échantillon型的分析者中有大量副本。奇怪的是,réaction PCR在spécifique上,这意味着复制séquence souhaitée à部分的adn矩阵(échantillon)。这个specificite assuree par les点火药,是concues倒可能complementaires et年代'hybrider des地区specifiques de每cote d de la地区'ADN concernee(地区已基)。caractéristiques字体的聚合酶链反应技术可以使用à,例如,在标记上使用génotypage,在潜水员测试上使用séquençage。

图1所示。聚合酶链反应étapes: 1。变性,2。杂交等。3。扩展。在étapes sont répétées上,我们可以看到(30),生成数以百万计的副本,然后是régions spécifiques。

*La PCR comporte trois étapes:变性,2。杂交等。3。扩展。étapes这是répétées,它的名字是(30),并产生数以百万计的副本,然后是régions spécifiques。

Les étapes de la PCR

在试管PCR中,préparer有无数个拷贝,每个循环répétés个synthèse个,然后effectués个。垂序理解étapes distincte définies par la température(图1)。垂序理解réalisés无干涉,但机器PCR,则可转换自动垂序理解température pour étapes。

  1. L'étape de dénaturation(95ºC): à这是température élevée,联络员hydrogène我们把两个带进笼子里,让我们带进笼子里désagrègent。L'ADN monocaténaire peut maintenant être copié。
  2. L'étape d'杂交(54℃): à 54°C,法院morceaux d'ADN appelés amorces se se lient complémentaires de l'ADN矩阵。définissent la séquence cible,是-à-dire la région spécifique de l'ADN s sera copiée。température杂交是其它成分的calculée à部分(nucléotides的数量是鸟嘌呤和胞嘧啶的数量)。正常情况下,我们可以计算température最优杂交条件。因此,在considère上如果54°C就是température最优的。
  3. L'étape d'扩展(72ºC): à 72ºC,一个酶appelée ADN polymérase est responsable de la copy de l'ADN。Elle reconnaît l'extrémité 3 ' d'une amorce liée à un brin et开始à复制l' adn矩阵。

À这是一个循环,从第一个开始到第été doublées个数字。例如,à la fin des 30 cycles习惯元素effectués dans la PCR, au moin 1 milliard (230.)的副本séquence cible seront présentes在管。对于一个聚合酶链反应,你们可以使用一个polymérase耐高温的,nucléotides,然后你们可以使用这个矩阵。

Les réactifs de la PCR

  • Les点火药:在séquence d'ADN spécifique和marquent le début放大的d'ADN。
  • Les核苷酸:les nucléotides sont nécessaires pour construire la nouvelle séquence d'ADN。
  • 聚合酶:La polymérase是一个酶,它在séquence矩阵的碱基上组装成nucléotides。
  • L 'ADN矩阵:一个矩阵是nécessaire为基底的servir à为新放大的séquence d’adn。

当你préparez一个expérience的聚合酶链反应时,你必须très注意潜在的污染。聚合酶链反应是一种技术très采用渗透放大法。分别表示微小的感染(例如,姓氏名称échantillon),分别表示également être amplifié,输入compétition和modèle分别表示姓氏名称“中国雄”。倒避开吹捧污染,你们devez始终我们子女等研究在environnement)非常清洁的(changez les embouts de吸管当你们prelevez de l 'ADN在另一个收件人,attachez vos cheveux不toussez等n 'eternuez不是proximite du计划de阵痛de la PCR,等等)。

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