聚合酶链反应是用米利亚登和科比恩的方法进行的DNA- Quequenzen。

Für·迪纳 - Shequenz oder-länge·雷德尔·雷德尔·雷德尔·萨扎尔·冯·斯皮恩·斯皮尔斯·斯汀·贝斯特·贝··本·彭··贝尼特·斯内扎··彭卓··彭··彭··本··彭Darüberhinaus ist die pcr-reaktion hochspezifisch，d。H。Es Werden Nur Kopien derGewünschtenshedenz aus der Dna-moltize（DNA-探针）emergestellt。DieseSpezifitätwirddurch Die PrimerGewährleistet，Die So Konzipiert Sind，Dass SieKomplementärSindundSichAn Spezifische Regionen Auf Jeder Seite derGewünschtendna-cegion（Zielregion）anlagern。Diese Eigenschaften Machen Die PCR Zu Einer Leistungsstarken Methode，Diezzum Beispiel Bei der Genotypisierung von Markern，Vor der Semenzierung Oder Bei verschiedenen DNA测试Verwendet Wird。

Abbildung 1:Die PCR Besteht Aus Drei Schritten：1。der Denaturierung，2. der Hybridisierung（Anlahgerung）und 3. der伸长率。Die Schritte Werden Viele Male Wiederholt（Oft 30-Mal），Wodutch Millarden von Dna-Kopien Bestimmter Regionen Erzeugt Werden。

PCR-SCHRITTE.

UM Millarden von Dna-Kopien Herzustellen，Werden Viele Wiederthttzyklen der Dna-Synthese在einem PCR-Gefäßtrchgeführt。Jeder Zyklus Umfasst Drei verschiedene Schritte，Durch Durchied Mectiveatur Definiert Sind（Abbildung 1）。Ale Zyklen Werden在伊宁省PCR-GERÄTDURCHGEFÜHR，DAS DIE温度Nach Jedem Schritt AutomatischÄndernKann。

1. Denaturierung（95ºC）：北迪亚默霍恩温暖布兰登·温暖布兰登，死亡贝蒂登·德纳 - 斯特兰·斯曼纳·斯特滕·奥菲纳霍尔滕·伯登·伯恩·德纳 - 斯特兰沦陷的阿梅德兰德。DieEinzelsträngigeDNAIST Nun Zum KopierenVerfügbar。
2. Hybridisierung（54ºC）：Bei 54ºCbinden sich kurzeDna-stücke，Sogenannte Primer，komplatementäreStellender Dna-moltizate。Dee Primer Defieren Die ZielSquenz，D。H。Den Spezifischen DNA-Bereich，Der Kopiert Werden Soll。Die Hybridisierungs-Hemperatur Wird Anhand Der Primer-Zusammensetzung（Der Anzahl der Nukleotide Sowie der Anzahl der Gualinine und Cytosine）Berechnet。IrcormerweiseMüsstestduDie Optimale Hybridisierungs-Tempersaturfürjeden primer berechnen。在柴油秋天Gehen 54°C Als Hybridisierungs-TempersiturFürSplePrimer Aus。
3. 伸长率（72ºC）：Bei 72ºCist ein enzym namens dna-polymedasefürdaskopierenderdnazuständig。Es Erkennt Das 3'-Ende Eines A Einen Matrizenstrang Gebundenen Primers und Breginnt Mit Dem Kopieren der Dna-Mortize。

Am Ende Eines Zyklus Sind Teile derursprünglichendna-stränge在Ihrer Anzahl verdoppelt。我是ende von z。B. 30 Zyklen，Die Bei derPCRÜblicherwiseDurchgeführtWerden，Befinden Sich Mindestens 1 Milliarde（2^30.）Kopien der Zielsequenz ImRöhrchen。ZurDurchführungder PCRBenötigstdueineHavicostabileDNA-聚合酶，Nukleotide，底漆und DoDNA，Di Du Als Mortwenzen Willst。

PCR-ReaGenzien.

Für死亡Durchführungeines pcr-epliments werden mehrere reagenzienbenötigt;

• 底漆：底漆结合Eine Bestimmte DNA-Sequenz und Markieren den Beginn der DNA - 放大器
• Nukleotide:Nukleotide WerdenBenötigt，汤姆死Neue DNA-Sequenz Aufzubauen
• 聚合酶:DAS聚合酶IST EIN ENZYM，DAS DIE NUKLEOTATE AUF DER Grondlage Der Matrizen-Sequenz Zusammensetzt
• DNA族化：EINE MORTOIZE WIRD ALS GRUNDLAGEFÜR模具放大器Der Neuen DNA-SequenzBenötigt

Bei der Vormereitung Eines PCR-Expliments Musst du Besonders Vorsichtig Sein，UmmöglicheVerunreinigungenZu Vermeiden。Die PCR ISTEIISTUNGSFÄHIGE甲铁族ZUR SAXSIPATION von DNA。Das Bedeutet，Dass Bei Einer Winzigen Verunreinigung（Z.DNA Aus Anderen Proben）Diese DNA EbenfallsVervielfältigtWerdenkann und Mit derUrsprünglichen·罗基·克隆·克隆·克里斯特，Wodutch Diebnnisse Deines实验Unbrauchbar Werden。UM Verunreinigungen Zu Vermeiden，Solltest du Stes Handschuhe Tragen Und在Einer Sehr Sauberen Umgebung Arbeiten（威奇杜阿斯·埃因姆和艾伦GefäßPitzen，BindeDeyine Haarezusampentiers，Huste Oder Niese Nicht In derNäheder PCR-Werkbank USW。）。

Wie Oben Beschrieben，KönnenFhlerBei Einem PCR-Experiment Leicht Das ErgebnisVerfälschen。DeshalbMüsseniriefehlerwahrscheinlichkeit bei der pcr mineieren，insbesondere wenn wirwiriiteenschließendeineweitere besonders empfindlichen technik wie das下一代测序（NGS）Durchführen。Iscormerweise Besteht Die PCR Beim Ngs Nur Aus 10-12 Zyklen。Die Bei der PCR Auftretenden Fehler Zeigen Sich Beim Abgleich der Ngs-Daten Als Mismatches，Das GiltBENONDERSFÜRECHLER在FRÜHRENPCR-DERCHLÄUFEN，MEHREREN MESSERGEBNISSEN（READS）Zeigen undFälschlicherwiseENEIGENundfälschlicherweiseeine genetische在Der Probe vermuten Lassen中的变化。