核糖核酸酶H（RNase H）是一种核糖核酸这通过水解机制催化RNA的裂解。这些酶被发现许多不同的生物，包括细菌，古细菌和真核生物。

RNase H在DNA/RNA双链体底物中切割RNA的3'-O-P键以产生3'-羟基和5'-磷酸终止产物。在DNA复制中，RNase H负责去除RNA底漆，从而完成新合成的DNA。