分光光度法分析的一般方法如下:
1.选择波长
根据比尔-朗伯定律，对于每个波长，吸光度与浓度成正比。为给定的样品选择最大吸光度的波长，并用于吸光度测量。
2.规划校准图
为了能够确定样品中分析物的浓度，需要一个校准曲线。校准曲线是通过测量几种浓度而得到的，这就形成了一个线性图。这些测量包括低于或高于真实样品中分析物预期浓度的浓度水平。
图1所示。校准曲线。
3.测定未知样品的浓度
一旦建立了校准曲线，就可以在同一波长下测量任何未知溶液的吸光度，并从图中读出或从斜率中计算出其浓度。
重要的是要准备一个参考空白每次测量都使用分光光度计。参考空白是一种不含感兴趣的分析物的溶液。
空白校正分光光度计，并设置溶剂的吸收为零。这确保结果只与分析物有关，而与溶剂中的任何其他化合物无关。
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