胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，存在于许多脊椎动物的消化系统中，可以水解蛋白质。它主要在氨基酸赖氨酸或精氨酸的羧基侧切割肽链，除非后面跟着脯氨酸。在细胞培养中，胰蛋白酶被用来打破固定细胞培养皿的局部粘连以及钙粘蛋白介导的细胞-细胞粘连，这样我们就可以收获单个细胞。胰蛋白酶的作用机制受血清蛋白、钙、镁的抑制;在钙离子存在的情况下，钙粘蛋白对胰蛋白酶有抗性。因此，大多数胰蛋白酶溶液中还含有EDTA, EDTA可作为钙螯合剂。此外，我们还需要先用不含钙和不含镁的PBS清洗细胞。最后，重要的是，胰蛋白酶与细胞的孵育时间不能超过2-5分钟，因为胰蛋白酶在此之后会对细胞产生毒性。

胰蛋白酶溶液通常来源于动物，使用前必须在-20°C保存，37°C预温。