所有ELISA都依赖于特定的相互作用或抗体和抗原。ELISA方法有许多变化。这里列出的是最常见的ELISA类型:

直接Elisa

  • 优势

    • 快点因为它只使用一种抗体
    • 它消除了抗体之间的交叉反应。
  • 坏处

    • 不灵活且昂贵:主要抗体必须单独标记,不能用于多个实验
    • 信号的放大程度较小。
  • 通常使用:分析对抗原的免疫反应。

间接ELISA

  • 优势

    • 高灵敏度:原代抗体具有多个表位,而不是由多个二级标记抗体结合,这会扩增信号。
    • 灵活的:不同的主要检测抗体可以与单个标记的二抗体一起使用。
    • 标记的二抗的许多变体是商业上可用
  • 坏处

    • 交叉反应二抗可能发生。
    • 需要额外的孵化步骤。

图1:ELISA的类型

  • 通常使用:确定样品中的总抗体浓度。

三明治Elisa

  • 优势

    • 非常高灵敏度:使用两种抗体,以便特别捕获并检测到抗原。抗原在测量之前不需要纯化
    • 灵活性:可以使用间接检测和直接检测。
  • 坏处

    • 需要一对匹配的一对:抗体组合优化可能很困难。每种抗体必须与靶蛋白上的一个特定表位反应,并且不能与其伴侣抗体反应。
  • 通常使用:分析复杂样品。使用此方法,我们不需要事先净化抗原。

竞争性ELISA

  • 优势

    • 高灵敏度:它可以特异性地检测到相对较少的抗原。
    • 不需要样品处理。
    • 更高的精度,准确性和可重复性。
  • 坏处

    • 假阳性:低特异性。
  • 通常使用:检测不能由两种不同抗体(例如三明治ELISA技术)结合的小抗原。这种ELISA方法通常仅用于抗原可用时。

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