联合抑制剂acomptitivo contentoua con El complejo enzima-sustrato,pero no con la enzima sola。En el caso de ladiNubiciónAcompetitiva,laecuacióndoblesrecíprocoses la siguiente:

1/v0=α’/v最大限度+ km/v最大限度•1/[S]

en laqueα’= 1+ [i]/k’

Esta ecuación muestra que una gráfica de dobles recíprocos de datos de cinética enzimática con concentraciones distintas de un inhibidor acompetitivo debería dar una línea recta con diferentes intersecciones en y, pero con las mismas pendientes (figura 1).en los ensayos decinéticaEnzimáticacon un抑制剂acomptitivo,las kmy v最大限度AparentescambiaránCuandolas浓缩剂抑制剂Aumenten [1]。

A la izquierda, vemos una gráfica de Lineweaver-Burk con 1 dividido entre V en el eje y y 1 dividido entre la concentración de sustrato en el eje x.LaGráficaMuestraladimibiciónAcompetitivacomo treslíneasdiferentes diferentes de Color Verde,Azul y Rojo。estaslíneas代表DIFERENTESgráficascon Diferentes浓缩剂抑制剂aComptitivo,y laslíneastienen tienen las las mismas pendientes。罪恶禁运,las treslíneasse cruzan con el eje y en puntos distos。LaLíneaazul se cruza con el Eje y en nun nun valormásBajoquelaLíneaverde;没有遗产,se cruza con y in valor superior a lalínearoja,que es la que se cruza con con y en el el el el el el el el el el el el el el el valormásbajo。A la derecha hay otra gráfica, que muestra la intersección en y de cada regresión lineal con respecto a la concentración de inhibidor.LaGráficaMuestraQue,Medida que aumenta lacompencióndel抑制剂,tambiénlohace la hace laintersecciónen y de lailinea de lilíneaderegresión线性。

figura 1:a)gráficade lineweaver-burk que muestradimunibiciónacompetitiva。b)cada in y de cadaregresión线性依赖浓度抑制剂。

cómo钙化k’i,kmy v最大限度

cuando trabajamos con un抑制剂acomptitivo,no se pueden contular losparámetrosa partir de lasgráficasde lineWeaver-burk-burk iniciales。para carcular los diferentesparámetros,las secciones en y de estasgráficastienen que代表con savers con con to la la la la la la la la la la la la de抑制剂:

IntersecciónEnyacompetitivo=α’/v最大限度= 1/v最大限度+ 1/v最大限度•1/K• [我]

por lo tanto,estagráficaDeberíaDarunaLíneaRínearecta conIntersección1/máxy pendiente 1/(v最大限度•k)。así,la kSe puede carcular dividiendo la pendiente deesaLínearecta intre laintersección。la v最大限度tambiénse puede cartular a partir de esta代表,llevando elrecíprocoa la laintersecciónen y。como lasgráficasde lineweaver-burk inicialesteníanteníanlas mismas pendientes,km/v最大限度,la kmahora se puede contular乘数多数最大限度OBTENIDA A PARTIR de lagráficade secciones en y y con con to las las las de抑制剂。

pasos para cartularlosparámetroscinéticosal usar unusar抑制剂acomptitivo

  • prepara lasgráficasde lineWeaver-burk de los datoscinéticosy代表datos usandoregresiónLineal(una代表浓缩剂抑制剂)。

  • traza las Intersecciones en y decadacióncomounafuncióndela la la la la la la la de抑制剂。

  • para carcular la V最大限度,coge elrecíprocodelainterseccióneny de esagráfica。

  • para量化k,划分LaIntersecciónen y deesagráficaentre la pendiente。

  • para量化km,vuelve a las primerasgráficasde lineweaver-burk,coge la pendiente de una de una de eSasgráficas(la pendientedeberíaser la misma,o muy parecida,en todas las las lasgráficas)最大限度

引用

  1. Lehninger,Albert L。;尼尔森,大卫·L。Cox,Michael M.(2008)。生物化学原理(第5版)。纽约,纽约:W.H.弗里曼和公司。ISBN 978-0-7167-7108-1。

抑制剂

Resumen delaTeoría

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