ES Gibt verschiedene Methoden der probenvormerceng,je nachdem ob Ein蛋白ExtrazelluläroverInarzellulärist。IntazelluläreProteineSind Schwieriger Zu Extahieren und Ihre Vorgehensweise MussSorgfältigausgearbeitetwerden。

ABBILDUNG 1:probenvorbereitungfürwesternblot
DerZelluläreAufbaueines jeden Organisus Besteht Aus Einer Komplex Mischung vonMolekülenWieQuoteN,Nukleinsäuren,Polysacchariden und Salzen。DieseMoleküleKönnenieWestern污染甲片甲铁克斯斯伦,Daher Ist Die ProbeNvormvormergentung So Wichtig。ES Gibt Zahlreiche Methoden des Zellaufschlusses,UM DieProbeFürdasWesternBlotting Vorzubereiten。Typischerweise Kannst du BeiSäugetierzellenDie Zellmembran Durch Durch Detergent-Lyse,Gefrier- / Auftau-Lyse Oder Mechische Homogenisierung und Beschallung Entfernen。
Nach der Extrapktion Wird Die Qualprobe在EinerLösungGekocht,Die Einen Tracking-Farbstoff(Bromphenolblau),EIN二硫糊糊剂 - Reduktionsmittel(β-巯基乙醇)unein洗涤剂(NatriumdodeCylfat / SDS)enthält。Das Kochen Denaturiert Das Protein und Entfaltet es达迪克。β-巯基醇verhindert die neubildung von divulfidbindungen und damit die unterbrechung derquartärenundtertiärenstruktur des蛋白,Wodutch lineare kettenpolypeptide entstehen。NatriumDodeCylsulfatSchränktdas蛋白MIT Enalativen Ladung Ein。