DNA聚合酶是负责从模板DNA链形成DNA链的酶。对于DNA聚合酶以引发新的DNA链的形成,它需要一个叫做A的短的“起动器”链底漆。引物必须与其互补的模板DNA的面积结合。

显示DNA聚合酶如何在PCR期间合成新DNA的图。第一步标记为:通过加热至95摄氏度,使双链DNA变性。伴随图像示出了两个互补的DNA股线,其具有左侧的顶股,其左侧和底部股线具有3个底线,左侧具有5个主要端部。下一步骤描述:在大约60摄氏度,引物退火到互补的底座上侧翼的底座。在顶部股线上,一个4个碱基对长底漆安装在支架的3个主要端部,左侧。在底部股线上,4个碱基对底漆附着在右侧的3个主要端。下一步:在72摄氏度下,Celsius Taq聚合酶延伸单链DNA分子,产生新的双链DNA。新的碱基对在每条股线上的5个主要方向上添加。最后一步:重复该过程25至35个循环,以扩增足够的材料以进行可视化。该图像显示两对双链DNA,每对由一条新的DNA和一股原始DNA组成。

合成新的DNA股

DNA聚合酶可以将核苷酸添加到与模板DNA结合的引物的3'末端,因为该端部具有可与进入核苷酸的磷酸盐基团反应的游离羟基(-OH)。因此,据说新的DNA链在5'→3'方向上合成。新的DNA链将与模板股线互补,并反平行。

制备用于PCR的热稳定DNA聚合酶(TAQ)

DNA聚合酶源于生物体,并且在生理条件下最常用。因此,来自大多数生物的DNA聚合酶在PCR反应中不能很好地适用,因为大多数聚合酶在90时脱落O.C.如果使用这种聚合酶用于PCR,则必须在每个循环后添加新的DNA聚合酶。幸运的是,Thomas Brock:Taq聚合酶发现了合适的DNA聚合酶。该DNA聚合酶从黄石国家公园的温泉中发现的细菌热水菌中分离出来。Taq聚合酶在温度下活跃,高达95O.C.这确保了可以在单个连续事件中进行多个PCR循环,并且不需要另外的聚合酶。

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