cDNA(kouspementäredna)istkouspementärzur mrna und wird wird durch durch dur das酶反式跨克利曲酶(RT)Aus der mRNA-mRNA-vorlage synthetisiert。da sie auf mrna basiert,Enthältcdna nur die exprimieren abschnitte eines Gens,Im Gegensatz Zu Genomischer DNA,Die Die GesamtegensecensepensenzEnterält。
bei der untersuchung von proteeinkodierenden地区des Genoms stellt die arbeit mit mrna einige einige herausforderungen dar。Am Wichtigsten ist,dass rna aufgrund derallgegenwärtigenrnasen leicht abgebaut wird。Daher Schafft逆转跨性von mRNA中的cDNA Eine stabilere undZuverlässigere探针fürdie die Analyse dieses dieses genomabschnitts,zum beispiel durch pcr。vor allem aber erfordernpcr-Basierte Techniken wie sequenzierung undqpcrDen Einsatz von DNA-Polymerasen,Die cDNA,Nicht Aber mrna als substratverwendenKönnen。
Derfür模具cDNA-synthe aus mRNAS MRNA verwendete底漆IST在der regel ein oligo(dt) - primer,der Sich an den polya polya polya polya-schwanz vonmrnimolekülenanllagern kann。Manchmal Werden AuchZufälligeHexamer-Primer Verwendet,Die Je Nach Sequenz des HexamersZufälligZufälliga jede rna在der Procee bindenwürden中。nach der cDNA-synthese wird ein dna-rna-hybrid gebildet。schließlichwird die rna durch rnaseh verdaut,因此,dass eineinzelsträngigescdna-molekülEntsteht,das direkt,in Jeder pcr-basierten technik technik verwendet werdenet werden werden kann。wird einedoppelträngigeDnaBenötigt,Kann Sich Die RectionErendeEinzelsträngigeDnaauf Sich selbstZurückfaltenund das 3er das 3er-ende bindet and einekomplementäredectäresequenz auf auf auf auf auf demselben strang。DIE RESURTIERENDEDOPPELTRängigeDNADNA DNA DNA底漆fürdna-polymerase,die denKomplementärenstrang Produziert。
bei der reversen transkription von mRNA,迪纳·埃纳·埃纳·格布罗布(Aus einer gewebeprobe)伊利特·沃德(Wurde)DaherFührenSehr Reichlich Vorhandene mrna-kopien(Aufgrund Hoher GenExpression)Zu Sehr Reichlich Vorhandenen cdna-kopien。Ebenso Werden Gene,Die Nicht Exprimiert Werden,d。H。von denen nur wenige oder gar keine mrna-kopien transkribiert werden,在der cdna-probe nicht vertreten sein中。