La chromatographie est une technique utilisée pour séparer un mélange en le faisant traverser un milieu dans lequel les composants du mélange se déplacent à différentes vitesses.

勒非常贴切chromatographievient des mots grecschroma, qui signifiecouleur, etgraphos, qui signifiedessiner. Ce nom a été choisi par le botaniste russe, Mikhail Tswett, en 1906. Il a séparé différents pigments d'un extrait de plante en chargeant un mélange d'échantillons sur une colonne de carbonate de calcium.

Étape 1. La phase stationnaire est chargée dans une colonne. Le solvant, qui est la phase mobile, est versé au sommet de la colonne, traverse la phase stationnaire puis s'égoutte en bas de la colonne. L'échantillon chargé est placé au sommet de la phase stationnaire. Étape 2. La phase mobile continue à progresser dans la colonne. L'échantillon chargé commence à descendre dans la colonne et une séparation partielle de l'échantillon se produit. Étape 3. L'échantillon s'est séparé en ses composants colorants. Le colorant B est plus haut dans la colonne en raison de sa forte interaction avec la phase stationnaire. Le colorant A est plus bas dans la colonne en raison de sa faible interaction avec la phase stationnaire. La phase mobile qui s'égoutte au bas de la colonne est recueillie dans des récipients. C'est ce qu'on appelle la collecte des fractions.

Figure 1 :la méthode de Tswett pour séparer un mélange de pigments d'un extrait de plante.

En faisant passer un solvant (phase mobile) à travers la colonne (phase stationnaire), les différents composants de l'échantillon s’écoulent dans la colonne à différentes vitesses en raison de leurs propriétés chimiques et physiques. Par conséquent, Tswett a séparé et recueilli chacune des trois molécules de colorant qui composent la chlorophylle, et a mis au point la chromatographie, une technique polyvalente désormais largement utilisée pour la séparation, la purification et l'identification des composés.


Les principes de la chromatographie

Les techniques de chromatographie

Les phases de la chromatographie

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