Delta Delta CT(ΔΔCt),Auch bekannt als livak-methode,iSt die amhäufigstenverwendete methode zur zur zur zur分析von qpcr-daten。

Die delta-delta-ct-Methode geht von einer wichtigen annahmebezüglichder pcr aus,nämlichdass die amplifikatikatizienz des referenzgens und verenzgens unddesGewünschtenZielgens Zielgens Zielgensungefährungefährgleich gleich gleich sein muss uss uss uss(auf 2 geSetzt)。konkret wird bei delta-delta-ct-methode davon ausgegangen,dass jeder pcr-zyklus die menge menge des des des des des des des probe genau genau genau verdoppelt(amplifikatikationsesefefizienz = 100%ODER 2)。Wenn Man Diese Methode Verwendet,Muss Man EineStandardKurve埃斯特伦(Erstellen),um Sicherzustellen,Dass Die Primerfürdas参考unddasGewünschteGen vergleichbare effizienzen Haben。Wenn Die Effizienzen Unterschiedlich Sind,Muss ManNeue Primer Entwerfen

Die Delta-Delta-Ct-Methode vergleicht die Differenz der Expression (ΔCt) zwischen dem gewünschten Gen (hier LEP) und dem Referenzgen (hier GADPH) zunächst unter den Versuchsbedingungen und separat in entsprechenden Positivkontrollen.

ΔCT(探针)= CT(Gewünschtesgen)-CT(Referenzgen)

dann vergleicht模具模具Dife dieldenz zwischen den persimentellen und den potitivkontrolllollproben。

ΔΔCT=ΔCT(实验探针) - ΔCT(pitivkontrolle)。

Die RelativedVeränderungender GenExpression Zwischen den beiden verglichenen sequenzen werden mit der formel2-ΔΔctBerechnet,Wobei 2 Die Auf 100%Festgelegte Effizienz Ist。

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