delta delta ct(ΔΔct),noto anche cose metodo livak,ide metodopiùpiùpiùcomunementeusato usato usato usato i Analizzare i dati qpcr。
Il Metodo Delta delta ct fa un Presupposto exigante sulla pcr,cioèChele efficienze di amplificazione del Gene di riferimento e del Gene del Gene di di Interesse intersesse devono essere Essere Essere Esserseimimimimitimatimativamente uguali uguali(造成a 2)。在特定保健中,IL delta ct Presuppone Che ogni ciclo di pcr raddoppi eSattamente lapontatitàdiMateriale Nel tuo Campione(Efficienza dell'Amplificazione = 100%O 2)。Ogni volta che si USA Questo Metodo,è必需creare una库尔瓦标准每个il primer primer per iL基因di RiferimentoE IL Gene di Interesse Hanno Efficienze比较。Se le efficienze sono多样性,必要Progettare nuovi底漆。
Il Metodo delta ct confronta la diferenza di spressione(Δct)trail gene di Interesse(qui lep)
Δct(Campione)= CT(Gene di Interesse)-CT(Gene di Riferimento)
Poi,Il Metodo Confronta la divernza tra Il Campione sperimentale eil Campione di Controllo Postitivo。
ΔΔCT=Δct(Campione Sperimentale)-ΔCt(Controllo Potivo)
Calcoliamo I Cambiamenti Relativi dell'espressione genica tra le due due sequenze面对Utilizzando la公式2-ΔΔct,Dove2èl'Fifficienzafissata al 100%。