L'antigène déposé sur une plaque multipuits est détecté par un anticorps qui a été directement conjugué à une enzyme. Dans la méthode moins courante, la position est inversée, l'anticorps étant déposé sur la plaque et un antigène marqué étant utilisé pour la détection. La méthodeELISAdirecte convient pour déterminer la quantité d'antigène de poids moléculaire élevé.