Die Sequenzierung Ist Eine Technikzzum“Ablesen”Der GenauenReihenfolge der Nukleotide在einem DNA片段中。克莱恩脱氧核糖核酸Fragmente,Ganze Gene Oder SogarGenomeKönnenShatenenziertWerden。
Die Am Weitesten Verbreitete DNA-Sequenzierungstechnik Basiert Auf der Von Sanger Entwickelten Kettenterminierung。柴胡甲基ist der聚合酶 - Kettenreaktion(PCR)SehrÄhnlich,Verwendet aber Nur Einen Primer,DerNäheder Zu Untersuchenden地区Am 3er-Ende der Dna-Vorlage andockt(Abbildung 1)。Währendder semenzierungsreaktion wird eine milchung aus normalen nukleotiden(Datp,dttp,dctp und dgtp)und“stopp”-nukleotiden(ddatp,ddttp,ddctp und ddgtp)zur dna-vorlagehinzugefügt。Die Stop-Nukleotide Sind Jeweils Mit Einer Bestimmten Farbe Markiert。在Jedem Zyklus Wird Die Ziel-DNA Dorch Eine DNA-聚合酶副副本,BIS EIN STOPP-NUKLEOTIDHinzugefügtWIRD,DAS DIE WEITEREVERLÄNGERUNGSTOPT(KETTENTERMINIERUNG)。Nach 35 Zyklen IstEineGroßeAnzahlvon fragmenten在allenmöghichenlängennerstanden。柴油碎片在Ein Spezielles acrylamidgel Gegeben,WoIhreLängeund“Endbasen”Festgestellt Werden。da die fragmente aufgrund ihrergrößeim gel aufgetrennt werden,werden die markierten nukleotide nacheinander nachgewiesen,Sodass die genaue dna-sequenz im碎片rekonstruiert werden kann。
Der Zweck der Semenzierung Ist Beispielsweise De Dermanage dermondenzezeenz einesgens gens,der vergleich von Arten Auf sendenzebene(基因Oder Genom)臭虫Diee Motee Nach Einer突变。

ABBILDUNG 1:SchematischerÜberblickÜberDie Sanger-Methode(Kettenterminierung)Zur Dna-Sequenzierung
Währendder elongationszyklen werden dna-fragmente allermöghichenlängenproduziert,Die Jeweils Mit Einem Farbigen Stopp-Nukleotid Terminiert Werden。Wenn Die Fragmente entsprechend IhrerGrößeAUFeinem gel getrennt werden,Zeigt Die Reihenfolge derbane die genaue dna-sequenz a。