这些培养系统使用灭活的成纤维细胞，化学成分不确定，且除非滋养层是人源性的，否则也可能含有外源成分。

成纤维细胞提供了多种蛋白质，最常见的是生长因子和细胞外基质蛋白，这是PSC生长所必需的。绝大部分的有滋养层培养系统采用经过辐射灭菌或丝裂霉素C处理的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 滋养层，使细胞周期停滞，以防止MEF过快生长并与生长较慢的PSC进行竞争。

有滋养层培养系统中含有大量支持PSC生长的组分，被认为是营养丰富且稳定的培养系统，在无滋养层系统出现多年后仍被广泛使用。

图1：使用有滋养层系统培养的PSC。