L'inoculum

Pour démarrer une fermentation, il faut une préculture avec un certain nombre de cellules saines en guise d'inoculum.

Pour calculer la quantité d'inoculum à ajouter dans le fermenteur, on peut utiliser la formule ci-dessous : V₁est le volume prélevé dans l'inoculum, C₁美国东部时间拉答应ration dans l'inoculum, V₂est le volume final dans le fermenteur et C₂美国东部时间拉答应ration voulue dans le fermenteur.

Une culture utilisée pour l'inoculation (inoculum) d'une fermentation doit répondre aux critères suivants :

• Être saine et active pour réduire au maximum la phase de latence

• Ne présenter aucune trace de contamination

• Posséder une forme morphologique adaptée

• 可能体积suffisant能用的

• Conserver ses capacités de formation de produit

Pour que la culture puisse être utilisée comme inoculum dans une fermentation à grande échelle, elle doit passer par plusieurs étapes de préparation :

• Préservation de l'inoculum

• Constitution/activation de l'inoculum : 1 à 2 cultures en flacon d'agitation

• Préfermenteur : 1 à 3 cultures de préfermenteur

• Fermenteur de production

Une culture qui satisfait à tous les critères d'un bon inoculum doit être transférée dans des flacons d'agitation pour activation. Avant de pouvoir être utilisé dans un fermenteur de production, l'inoculum activé doit être développé progressivement dans des préfermenteurs. Une fois que toutes les étapes ont été réalisées sans contamination, l'inoculum est prêt à être utilisé dans un fermenteur de production.

Éviter toute contamination

L'une des pires choses qui puisse arriver lors d'une expérience de fermentation est la détection de contaminants. Les contaminants sont des microorganismes indésirables qui disputent les nutriments à la souche originale et perturbent l'expérience. Les contaminants peuvent être détectés au microscope ou à partir de l'ensemble des données. En général, les contaminants se développent rapidement. Cela entraîne une augmentation des niveaux de CO₂et de la concentration de biomasse par rapport au produit. Il est primordial d'éviter toute contamination ; le bioréacteur doit donc être stérilisé avant le début de la fermentation.

Lesbioréacteurspeuvent être stérilisés avec ou sans le milieu. Normalement, on les stérilise en chauffant l'enveloppe ou la bobine du bioréacteur avec la vapeur dans la cuve. Pour la stérilisation, la pression de vapeur à l'intérieur de la cuve correspond à 1 bar et est maintenue pendant 20 minutes. Une fois la stérilisation terminée, il est important de maintenir une pression positive à l'intérieur de la cuve. Sinon, un vide peut se former et de l'air non stérile peut être aspiré dans la cuve.