您需要使用血球计数器进行手动细胞计数。血球计数器是专用于细胞计数的显微镜载玻片。该载玻片的中间有凹槽;凹槽区域以网格标记。在凹槽中滴入一滴细胞培养物。研究人员可以在显微镜下观察样本,使用网格对特定区域内的细胞进行手动计数。凹槽的深度是预定义的。因此可以计算计数培养物的体积,从而计算出细胞浓度。

图1:手动血球计数器,放大显示了其中计数细胞的网格。

使用下列步骤:

  • 用10X物镜聚焦血球计数器的网格线。
  • 使用手动计数的计数仪,计数其中一组16个方格内的细胞。计数时,仅计数方格内或右侧或底部边线上的细胞。
  • 移动血球计数器至下一组16个方格,继续计数,直至完成全部四组16个方格的细胞计数。
  • 取每组16个方格的平均细胞计数,乘以10,000 (104)。
  • 如果您稀释了细胞 (使用培养基或台酚蓝),则还需要乘以稀释倍数。
  • 最终值为每毫升原始细胞悬液中的活细胞数。
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