然后拉一代d望去,我们可以prêts à从séquençage开始。我有很多人façons效应器Séquençage de nouvelle génération平台的功能utilisée。在这个实验室里,我们的知识很少sequencage par综合d 'Illumina。données和séquençage隐含在synthétisant的基础上。Examinons ce突起。

固定德拉polymérase

另一个克隆是fixé à有缺陷的,réactifs的séquençage的,envoyés的。它是这样的côté它是这样的还有其他的。L'ADN polymérase T4 est injectée et se se aux court molécules d'ADN liées à la lame de verre。polymérase T4 modifiée为一个seule基地的结合提供了条件。

Les 4 nucléotides sont marqués par un荧光团spécifique。你们可以根据图1来观察,胸腺嘧啶是marquée一个荧光团绿色,胞嘧啶和UN荧光团蓝色,鸟嘌呤和UN荧光团胭脂Et l'adénine avec UN荧光团橙色.nucléotides sont également modifiés: ils possèdent a nucléotide à à l'extrémité在nucléotide à下依次类推。在conséquent,一个nucléotide和été ajouté à 'extrémité的地方,还有一个可以解决问题的地方。所有人nucléotides librres sont ensuite éliminés du système。

图1:séquençage par synthèse。另一个polymérase是fixée à,另一个荧光团spécifique是nucléotides marqués, 'extrémité 3', 'extrémité 3'。Les nucléotides sont modifiés一个化妆à l'extrémité 3个可以让你去看一个人的脸。信号荧光émis,荧光团为détecté,而信号à l'extrémité 3′为découpée,此依次类推。Nucléotides marqués par un荧光团

检测

我们可以用nucléotides sont marqués作为一个荧光团spécifique,我们可以用nucléotides观察信号荧光émettent。例如,在图1中,我们可以看到nucléotide marqué有一个荧光团绿色一个été ajouté à l'extrémité 3' de l'amorce。一个réaction chimique déclenche l'émission de la lumière植物香可以être enregistrée en prenant une照片。我们知道胸腺嘧啶是marquée荧光团指向,我们知道déterminer的基础是胸腺嘧啶。四张照片à这是一个可以记录颜色的循环。Après有四张照片,有système张照片叠加。因此,我们可以在这个基础上进行设备标识(见图2)。

图2:一个图像superposée,查点的颜色représente和amplifié的克隆façon。四色代码nucléotides différents:胸腺嘧啶,胞嘧啶,鸟嘌呤和adénine。

Clivage等消除

Après这张照片,这朵花à l'extrémité 3’就像nucléotide在一个周期内依次开始。La coiffe 3' clivée est ensuite retirée du système。从séquençage的一个循环开始,新的循环可以从séries的代表开始nucléotides和répétant的代表étapes。

Après le séquençage,图像sont介绍在一个顺序等Données de séquençage peuvent être analyséesAvec UN logiciel spécifique。

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