为了实现最大再现性和准确的混合，建议通过在无血清培养基中稀释它们来单独制备DNA和转染试剂。

• DNA的制备。DNA纯度对于实现高转染效率非常重要。通常，这是使用a测量的_260./一种₂₈₀比率。转染实验的理想DNA纯度在1.7和1.9之间。如果DNA纯度低于1.7，则该样品含有与提取方案相关的残留酚或另一种试剂，或者您的DNA浓度非常低（<10ng /μl）。所需量的DNA将取决于板尺寸。当使用Lipofectamine 3000时，稀释的DNA在优选中将保持稳定，减少血清络合培养基最多4小时。

• 转染试剂的制备。使用脂质溶胺3000时，需要制备两种试剂：

  • Lipofectamine 3000：这是转染试剂本身，其将在单独的管中稀释，并将稳定为高达20分钟。其功能是帮助核酸逸出细胞内的内体。当与核酸混合时，它将形成DNA转染试剂复合物。

  • P3000试剂：将该试剂加入稀释的DNA溶液中，其功能是帮助进入细胞和细胞核的核酸。有关更详细的描述，请检查Lipofectamine 3000的分子机制。