必须去除PSC培养物中的分化细胞。在下图中,您可以看到如何鉴别自发分化区域。

自发分化

图1:红色虚线内自发分化的PSC (A)。

要去除这些细胞,您可以在层流通风橱内使用细胞成像系统或者在层流通风橱外使用显微镜物镜标记物,在分化区域的培养皿底部标记,然后将培养皿放入层流通风橱内,使用标记物作为指导。

随后使用无菌玻璃吸管或者塑料移液器吸头 (如200uL),在无菌条件下分离自发分化的区域。弃去用过培养基及漂浮的分化细胞,补充新鲜培养基。

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