Die AUF Restriktionsenzymen BasierendeMolekulare KlonierungIST DIE“Klassische”Klonierungsode und Immer Noch Eine der Beliebtesten Technen。IM Prinzip Umfasst der Aufbau Eines质粒Die Folgenden Schritte:
Restriktionsverdau:GeschlossenesZirkuläresvektorplasmid und碎片des fraglichen gens werden mit einem oder mehrerenRestriktionsenzymen.Gespalten。
结扎:DNA-Fragmente mit KompatiblenÜberhängenWerden在艾因LinearisiertesVektorplasmidLigiert。
HÖHEREERFOLGSQUOTENWERDER ERZIELT,Wenn DNA-Fragmente Mit 5'-臭杂物3'-Klebrigen /ÜberhängendenEngverwendetWerden,Anstatt DNA-Fragmente Mit Stumpfen Enden Zu Assemblieren。