从样品中提取RNA并反转录到cDNA您准备使用RT-QPCR量化成绩单。

转录本只能相对于参考基因进行量化。参考基因通常是细胞必不可少的基因，因为它们是基本细胞功能所需的。预计在正常和患病条件下，在生物体的大多数细胞中，参考基因将在相对恒定的水平上表达。

选择一个参考基因和设计底漆对针对您的目标和参考基因。

在从QPCR实验开始之前，您需要为每个底漆对生产主混合物。使用完全相同的底漆浓度并添加QPCR试剂。

QPCR试剂包含： - sybr -green，当结合双链DNA时荧光。- DNA聚合酶以扩增DNA。

将您的cDNA样品与每种主混合物混合，然后开始QPCR实验。