阻容色谱是阻容色谱的一种液相色谱法根据分子的大小将样品中的分子分开。

固定相通常是由具有特定尺寸分布的球形多孔微珠组成的凝胶。根据不同分子的大小,它们将被包括或排除在珠子内部的孔中。在洗脱之前,孔隙中包含的那些将在固定相中停留更长时间,而那些被排除在外的将洗脱得更快,因为它们将不会保留在基质中。因此,较小的分子将比较大的分子洗脱晚(图1)。

尺寸排阻色谱分离分子的原理。首先,将由不同大小的分子组成的样品混合物——红色大球体、中绿色小球体和蓝色小球体——注入填充有灰色大球体(多孔填料)的柱中。随着时间的推移,分子从顶部向底部移动,红色的大球比较小的球降落得更快。首先是大的溶质,红色的球,被洗脱。然后,中溶质,绿色球体,被洗脱。最后,蓝色小球的小溶质被洗脱。这些洗脱被描绘在图表下面的洗脱曲线上。可以看到有三个峰,第一个峰保留时间最短,对于大球,第二个峰保留时间最长,对于中等球,最后一个峰保留时间最长,对于最小的分子。

图1所示。尺寸排除色谱法的例子。

决议色谱图的确定取决于几个因素。

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