La colturaunlaboratorio di livello di biosicurezza IIIsi effettua come quella in un normale laboratorio, tuttavia sono necessarie maggiori precauzioni. Per questa ragione, non viene utilizzata nessuna provetta con tappo a scatto e la "tecnica del mignolo" viene utilizzata per aprire i tappi a vite in sicurezza mentre si pipetta. La classe III è ritenuta più sicura quando le colture sono superiori a 25 mL, perché l'agente non è eccessivamente concentrato.
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