顾名思义,单端测序是指测序过程只从一个方向进行。正如我们之前在集群的一代桥接PCR扩增后,我们得到了两种互补的DNA分子,我们把其中一种洗掉了。然后,我们对剩下的具有相同方向的DNA进行测序。如果我们只对这些DNA进行测序(所有的DNA都有相同的方向),就称为单端测序。
在双端测序中,DNA是从两个方向进行测序的(见图3)。测序过程与单端测序相同,但测序过程结束后,我们继续进行另一轮的集群生成,并按照我们之前测序的方向(有蓝色适配器的DNA)移除链。因此,我们只剩下带有紫色适配器的DNA。这个DNA与第一个DNA具有互补序列。
当使用成对端测序时,我们可以以更高的可信度检测基因组中的结构变异,因为与单端测序相比,我们有更高的序列覆盖率和更高的特异性,而单端测序只涉及DNA片段的一端。在对长DNA片段进行测序时,首选对端测序。当我们想要研究缺失、突变或染色体重排时,最好使用成对端测序。

图1所示。成对测序是指从两个方向进行测序。DNA需要通过运行另一轮的集群生成来翻转。