撒布法是指将微生物均匀地分布在琼脂平板表面的方法。用培养基将少量的微生物培养物均匀地涂抹在琼脂表面无菌撒布机。

有许多不同的传播方法。一些技术使用无菌玻璃珠,可以在琼脂表面滚动,以分布细胞。通常会使用一种叫做“扩展器”的特殊工具。下图展示了一次性塑料摊铺机和可重复使用的金属摊铺机。

以下是使用可重复使用的玻璃撒布器进行撒布过程的概述:

  • 玻璃撒布器应使用本生燃烧器火焰消毒。首先,将玻璃撒布器浸入酒精(70%乙醇)中,抖掉多余的酒精,点燃残渣。然后,让吊具冷却。
  • 将微生物培养液均匀地涂抹在培养基板表面。当玻璃沿介质表面扩散时,应均匀施加压力。
  • 让微生物培养物被培养基板吸收。
  • 将培养皿倒置孵育,以避免水滴(冷凝)在培养皿上形成。

涂布法用于分离高度稀释的培养物中的单个细胞,如转化后的细胞克隆.将细胞散布在琼脂平板上后,每个细胞将产生克隆的菌落。如果细胞溶液中含有过多的细胞,就不可能分离出单个的菌落。在这种情况下裸奔法应该用来隔离单个菌落。

选择一个单一的菌落来分离纯遗传克隆是很重要的。菌落是源于同一来源的一组细胞;因此,单个群体中的所有细胞都包含相同的遗传信息。

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