当使用哺乳动物细胞进行蛋白表达时，必须在转染前一天传代细胞。这不仅可以为细胞提供新鲜培养基，还可以确保转染当天达到理想的细胞密度，且有助于标准化流程，以获得最佳的结果可重复性。使用ExpiCHO-S细胞时，最佳的细胞传代密度是3-4 x 10⁶个活细胞/毫升。