癌症药理学:为数百万美元的虚拟实验室项目提供建议

在这个模拟中，您将了解需要使用哪些工具来筛选数千种化合物，以确定治疗不同类型癌症的有希望的候选者。特别是，您将深入了解在抗癌药物筛选的背景下广泛使用的体外检测的原理和局限性。作为一名药理学专家，您将测试那些常用技术的稳健性，并帮助筛查机构评估假阴性结果的风险。

为化学敏感性试验准备细胞和药物

你在癌症药理学模拟中的主要任务是重现筛选设备的体外化疗敏感性方案来调查假阴性结果的原因。所讨论的方案是一种广泛使用的细胞生存试验，使用MTT试剂和传统的癌细胞系进行。项目负责人建议使用两种知名的化疗药物:表柔比星和环磷酰胺进行试验。在这一部分的模拟中，您将了解如何执行化学敏感性测试的常见步骤，并了解基本的药理学工具。最重要的是，您将计算细胞培养液中的活细胞，并计算出您的实验需要多少培养液。您还将准备给定浓度的两种药物的储备溶液，以创建用于治疗癌细胞的稀释系列。

进行MTT试验

一旦细胞准备好并与药物孵育，就可以使用MTT作为细胞存活指标。您将能够在分子水平上了解MTT如何与线粒体酶特异性反应，导致颜色比色变化，可以用分光光度计测量。在本任务中，您将使用多通道移液管和96孔板来执行在全球许多药理学实验室中使用的分析。

确定EC50并解释你的结果

MTT试验中一系列药物稀释的结果将为建立剂量-反应曲线和确定两种临床使用药物的半最大有效浓度(EC50)提供基础。关于常用体外检测方法的有效性，您将向项目负责人提供哪些建议?