El detector es la parte del sistema de HPLC en la que se identifican y cuantifican los analitos que salen de la columna (cálculo de la concentración). El ordenador procesa el resultado del detector, siendo el cromatograma el típico resultado que representa la intensidad de la señal frente al tiempo de retención. La intensidad de la señal mide la cantidad de analito que detecta el detector. Comparando la intensidad de la señal con una curva de calibración, podemos conocer la concentración exacta del analito. El tiempo de retención es el tiempo que el analito necesita para recorrer la columna, y viene marcado por el período entre la inyección de la muestra y su paso por el detector.
Detectores específicos:
探测器UV / VIS. La luz se desplaza desde la fuente, pasando por una rendija, y se dispersa en varias longitudes de onda mediante un dispositivo de dispersión (un prisma). A continuación, la luz pasa por otra rendija llamada «rendija de salida». Esta rendija actúa como un selector que solo permite el paso de una determinada longitud de onda y esta, a su vez, atraviese la muestra. La cantidad de luz que ha atravesado con éxito la muestra es posteriormente cuantificada por el detector.
- 探测器UV / VIS: La señal (también llamada respuesta) se corresponde con la absorbancia de la estructura que absorbe la luz UV de un compuesto o grupo de compuestos específicos. Cuanto mayor sea la concentración, mayor será la absorbancia.
- Detector de matriz de fotodiodos (PDA): el PDA se utiliza junto con UV y crea un escáner de longitudes de onda para cada compuesto. Mediante el uso de PDA es posible monitorear varias longitudes de onda al mismo tiempo.
- Detector de fluorescencia: la señal se corresponde con la fluorescencia de los compuestos. La muestra con mayor concentración emite una señal más fuerte. El detector de fluorescencia es el más sensible de entre todos los detectores modernos de HPLC.
- Detector espectroscópico de masas (EM): el EM funciona mediante la obtención de iones de las moléculas de la muestra. Estos iones proporcionan información sobre eL peso molecular del compuesto. Estos iones se pueden generar por la fragmentación de los compuestos debido a un campo eléctrico aplicado. Cuanto mayor sea la concentración, mayor será la cantidad de fragmentos y mayor la señal.
Otros detectores:
- Detector de índice de refracción: se basa en los cambios en el índice de refracción cuando la luz pasa a través de los compuestos eluidos.
- Detector electroquímico: se basa en la oxidación o reducción electroquímica de los analitos en la superficie de un electrodo.
- Detectores de dispersión de luz: la respuesta depende de la luz dispersa procedente de una fuente láser y es proporcional a la masa de los analitos.
El espectroscopio UV es el detector más utilizado en cromatografía líquida. La mayoría de los compuestos pueden detectarse por UV y con una buena sensibilidad (normalmente en el rango de 1-10 ng). Sin embargo, no todos los compuestos pueden ser detectados por un detector UV/VIS. Por ejemplo, los hidrocarburos saturados y los azúcares que carecen de dobles enlaces, son muy difíciles de detectar con el detector UV, tales como: metano, butano, pentano, hexano, octano, etc. Estas moléculas tienen enlaces sigma (σ) que son muy estables y requieren mucha energía para poder excitarlas, por eso son difíciles de detectar con el detector UV.