Le détecteur est la partie où les analytes qui sortent de la colonne sont identifiés et quantifiés (calcul de la concentration). Le résultat du détecteur est traité par l'ordinateur et le résultat typique est un chromatogramme représentant l'intensité du signal en fonction du temps de rétention. L'intensité du signal mesure la quantité d'analyte qui est détectée par le détecteur. En comparant l'intensité du signal à une courbe d'étalonnage, on peut connaître la concentration exacte de l'analyte.
Figure 1 :Détecteur UV-vis. La lumière part de la source, passe par une fente et est dispersée en différentes longueurs d'onde à l'aide d'un dispositif de dispersion (un prisme). La lumière passe ensuite par une autre fente appelée la fente de sortie. Cette fente agit comme un sélecteur qui ne permet qu'à une certaine longueur d'onde de passer et de traverser l'échantillon. La quantité de lumière qui a traversé avec succès l'échantillon est ensuite quantifiée par le détecteur.
- Détecteur UV-Vis: Le signal (également appelé réponse) correspond à l'absorbance de la structure absorbant la lumière UV d'un composé spécifique ou d'un groupe de composés. Plus la concentration est élevée, plus l'absorbance est élevée.
- Détecteur à réseau de photodiodes (PDA): Le PDA est utilisé en combinaison avec les UV et crée un balayage de longueur d'onde pour chaque composé. En utilisant le PDA, il est possible de contrôler plusieurs longueurs d'onde en même temps.
- Détecteur de fluorescence: Le signal correspond à la fluorescence des composés. L'échantillon ayant une concentration plus élevée émettra un signal plus fort. Ce type de détecteur est le plus sensible parmi les détecteurs CLHP modernes.
- Détecteur spectroscopique de masse (MS): Le MS fonctionne en créant des ions à partir des molécules de l'échantillon. Ces ions fournissent des informations sur le poids moléculaire du composé. Ces ions peuvent être générés par fragmentation des composés sous l'effet d'un champ électrique appliqué. Plus le site concentration est élevée, plus la quantité de fragments est importante et plus le plus le signal est élevé.
Autres détecteurs :
- Détecteur d'indice de réfraction: Basé sur les changements de l'indice de réfraction lorsque la lumière traverse les composés élués.
- Détecteur électrochimique: Basé sur l'oxydation ou la réduction électrochimique des analytes à la surface d'une électrode.
- Détecteurs à diffusion de lumière: La réponse est basée sur la lumière diffusée par les molécules à partir d'une source laser et est proportionnelle à la masse des analytes.
La spectroscopie UV est le détecteur le plus utilisé pour la chromatographie liquide. La plupart des composés peuvent être détectés par UV avec une bonne sensibilité (généralement dans la gamme 1-10ng). Cependant, tous les composés ne peuvent pas être détectés par un détecteur UV-vis. Les hydrocarbures saturés et les sucres dépourvus de doubles liaisons sont par exemple très difficiles à détecter à l'aide d'un détecteur UV, comme le méthane, le butane, le pentane, l'hexane, l'octane, etc. Ces molécules ont des liaisons sigma (σ) qui sont très stables et nécessitent beaucoup d'énergie pour les exciter. C'est pourquoi elles sont difficiles à détecter à l'aide d'un détecteur UV.