没有单据
浏览本级别»的文章
蛋白质截断实验旁边的新文章 蛋白质截尾实验

显示蛋白质截断试验步骤的图表。首先，一个双链DNA螺旋显示。对感兴趣的DNA区域进行PCR扩增，以确保有足够数量的拷贝。接下来，进行体外转录和翻译。一条RNA链显示在3'端有一个起始密码子。以红点链表示的蛋白质在翻译过程中组装起来。然后使用SDS-PAGE对蛋白质进行分析，这是一种利用凝胶基质中的电流根据分子量分离蛋白质的过程。描述了SDS-PAGE结果的一个简单示例，其中凝胶托盘中的条带代表蛋白质。在托盘顶部靠近装载位置处显示一条全长蛋白带，而在托盘底部显示一条截断的蛋白带。

图1所示。蛋白质截断试验不同步骤的示意图。

蛋白质截尾检测由四个主要步骤组成(图1):

  1. 核酸分离;要么是基因组DNA，总RNA，要么是多聚a RNA。
  2. 利用感兴趣基因的特定区域进行扩增聚合酶链反应．在这一步中，起始密码子(ATG)被添加到扩增DNA的5'端。
  3. 在体外产品的转录和翻译。
  4. 检测翻译的蛋白质使用聚丙烯酰胺凝胶电泳．
Baidu