모든세포유전자끊임없이되는되는아닙니다아닙니다아닙니다。세포는된을생산하기위해위해위해서열mrna로로해야합니다합니다。따라서,유전자유전자은mrna수준에합니다。역전사중합반응(RT-PCR)을을유전자을할있습니다있습니다있습니다。RT-PCR은과로이뤄집니다이뤄집니다。

  • 역전사효소효소하여하여rna cDNA로로변환

  • PCR을을하여cDNA확장

그림1. mRNA템플릿으로cDNA를생성단계단계。mRNA는(dt)의프라이머를,cDNA로역전사후,RNA가닥가닥합니다합니다합니다합니다합니다。

mRNA는dna보다하고하고을통해없습니다없습니다없습니다없습니다。이런이유,mRNA는상보적적적적적로로됩니다됩니다。cDNA는rna분자분자된된된입니다입니다。cDNA합성은dna rna rna를를사용하며하며,역전사라고효소를됩니다됩니다됩니다됩니다。역전사는발견레트로바이러스고립되었습니다되었습니다。이러한바이러스에는rna게놈이있습니다。그러므로바이러스세포분자기계류와호환위해의의의의의복제복제생산합니다합니다합니다합니다합니다。

RT-PCR반응는같습니다。 - mrna의3'y(a)꼬리꼬리하기(t)의의프라이머로사용됩니다됩니다됩니다。

  • 역전사cDNA가닥을합성하는데데를를사용합니다합니다합니다합니다합니다합니다

  • 온도온도높이면rna-cDNA혼성체가됩니다됩니다。

  • 특정유전자그적배열강화됩니다됩니다。

  • DNA중합는결합에서시작하여,DNA가닥을합니다합니다합니다。

  • pcr주기주기주기반복됩니다됩니다됩니다됩니다됩니다됩니다됩니다。

rt-pcr반응끝날때,유전자유전자경우억에달하는대상가됩니다됩니다됩니다。

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